克痹康的抗炎、抑制免疫和镇痛作用

曹永孝  张风鸣  刘静  王世祥  王秉文

（西安医科大学药学系  西安  710061）

Anti-inflammatory Immunosuppressive and Analgesic Effects of Kebikang Tincture

Cao Yongxiao, zhang Fengming, Liu Jing, Wang Shixang, Wang Bingwen

(Faculty of Pharmacy, Xi'an Medical University, Xi'an 710061)

摘  要  克痹康0.12，0.3，0.75g/kg生药灌胃，能明显抑制大鼠佐剂性关节炎的原发生和继发性足跖肿胀，有增加佐剂性关节炎大鼠体重的趋势，能明显抑制大鼠蛋清性关节炎，能降低小鼠毛细血管通透性，抑制小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应，抑制小鼠网状内皮系统的吞噬功能，明显减少醋酸引起的小白鼠扭体次数。

关键词  克痹康  佐剂性关节炎  抗炎  抑制免疫  镇痛

Abstract: Kebikang tincture (0.12g/kg，0.3g/kg，0.75g/kg) obviously inhibited primary and secondary plantar swelling of adjuvant arthritis in rats, increased to some extent the body weight of rats with-adjuvant arthritis and tremendously relieved egg white-induced arthritis in rats, reduced the capillary permeability of mice, inhibited delayed hypersensitivity of mouse auricle, and decreased phagocytic function of reticuloendothelial system in mice, diminished the onset of the torsion induced with acetic acid in mice. The results indicated that Kebikang had anti-inflammatory, immunosuppressive and analgesic effects.

Key words: Kebikang, adjuvant arthritis, anti-inflammatory, immunosuppression, analgesic

    克痹康是治疗类风湿性关节炎的药酒，由当归、黄芪、牛膝、地龙、红花、雷公藤等组成，有祛风化湿、温经止痛、清热通络作用，临床总显效率85%。本文对其与功能主治有关的主要药效学进行研究，观察了其抗炎、抑制免疫和镇痛作用。

1   实验材料

1.1  药物  克痹康由西安市阎良630类风湿病专科医院提供，每100ml含生药21.2g，实验时配成所需浓度；强的松，陕西省黄河制药厂，批号940330，雷公藤片，湖北省黄石市制药厂，批号920422；可斯匹林，山西晋新制药总厂，批号930903。

1.2  动物  ICR小白鼠，体重18～22g，雌雄兼用；雄性SD大鼠，体重200±20g；均由西安医科大学实验动物中心提供。

2  方法与结果

2.1  对实验性关节炎的作用

2.1.1  对大鼠佐剂性关节炎的影响

2.1.1.1  对佐剂性关节炎原发病变的影响，雄性大鼠60只，随机分为6组：（1）常水组；（2）溶媒组（10%乙醇）；（3）～（5）克痹康小中大剂量组（0.12，0.3，0.75g生药/kg；）（6）强的松组（5mg/kg）。于注射佐剂前3天开始灌胃给药，每日1次，连续12天，灌胃容积均为10ml/kg。克痹康3个剂量的酒度均为10度，第3天给药后1小时，每鼠右后足跖sc Freund佐剂0.05ml（含结核杆菌0.5mg），按表1所示时间用毛细管放大法测右足跖容积，以给佐剂前后容积之差值作为肿胀度，判断药物对原发性病变的影响。结果表明（表达式），克痹康3个剂量对大鼠佐剂关节炎原发性足跖肿胀有明显的抑制作用。

表1  克痹康对佐剂性关节炎原发病变的影响

注：与常水组比较*P＜0.05  **P＜0.01（以下各表皆同）

2.1.1.2  对佐剂性关节炎继发病变的影响

    雄性大鼠60只，分组及致炎方法同前。致炎后第10天开始给药，每日一次，连续至致炎后21天，给药胆及给药后不同时间测非致炎侧（左侧）足跖容积，以给药前后容积差值作为肿胀度，每3日测体重1次，最后1次测量后，解剖大鼠，称胸腺、脾、肾上腺重量，计算脏器的系数。结果表明了，克痹康3个剂量组均可明显抑制佐剂性关节炎非致炎侧足跖肿胀（表2）。在整个观察期内，常水组，溶媒组和克痹康小剂量组大鼠体重均有不同程度降低，而克痹康中、大剂量组体重略增，但与对照组比较无显著性差异（表3）。克痹康对大白鼠脾脏、胸腺、肾上腺重量无明显影响。

表2  克痹康对大鼠佐剂性关节炎原发病变的影响

表3  克痹康对佐剂性关节炎大鼠体重的影响

2.1.2  对大鼠蛋清性关节炎的影响

    雄性大鼠54只，随机分为6组，ig给药，每日1次，连续3天，末次给药后1小时，右后足跖sc10%新鲜蛋清0.05ml，于不同时间用毛细管放大法测右后足跖容积，结果显示，克痹康3个剂量组均可明显抑制大鼠蛋清性关节炎的足跖肿胀（表4）。

表4  克痹康对大鼠蛋清性关节炎的影响

2.1.3  对其它炎症的作用

2.1.3.1  对大鼠棉球肉芽肿形成的影响

    选健康雄性大白鼠60只，体重130～160g，随机分为6组，背部正中线两侧皮下各埋入20mg的棉球一个，术后当日灌胃给药，连续7天，第8天处死大鼠，剥离肉芽组织，烘至恒重，减去原棉球重量，计算抑制率。结果显示，克痹康3个剂量组能不同程度地抑制棉球肉芽肿的形成，但与常水组比较无显著性差异（P＞0.05）。

2.1.3.2  对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

    选健康小白鼠60只，雌雄各半，随机分为6组。每日上午ig给药，容积10ml/kg，连续7天，末次给药后30min，尾静脉注射2%伊文斯蓝10ml/kg，随即ip0.7%的醋酸20ml/kg致炎。15min后处死小鼠，10ml生理盐水冲洗腹腔，将冲洗液离心后，在620nm处比色。测光密度。结果显示（表5），克痹康大、中剂量组能明显抑制腹腔染料的透出，表明它能抑制腹腔毛细血管的通透性。

表5  克痹康对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

2.2  对免疫功能的影响

2.2.1  对小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响

    将雄性小白鼠，随机分为6组，腹部脱毛后，用5%2.4-二硝基氯苯（DNCB）50ul涂于腹部皮肤致敏。致敏前一日开始灌胃给药，每日1次，连续9天。致敏7天后用1%DNCB涂右耳，24小时后处死动物，左右耳相同部位用8mm打孔器取耳片，称重，以左右耳重之差为迟发性超敏反应值（表6）。结果显示，克痹康大剂量组两耳重量差明显低于常水组。

表6  克痹康对DNCB所致小鼠皮肤迟发型超敏反应的影响

2.2.2  对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响

    实验分组同前，ig给药，每日1次，连续7天，末次给药后30min，各鼠尾静脉注射稀释5倍的印度墨汁0.1ml/10g，分别于给墨汁后2min和10min，从眼球后取血20ul，溶于2ml0.1%NaHCO₃，在600nm处比色测吸光度（OD），计算吞噬功能K值[K值=（lgOD₂-lgOD₁₀）/(t₁₀-t₂)×100%]。结果表明（表7），克痹康可明显抑制小鼠网状内皮系统的吞噬功能。

表7  克痹康对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响

2.2.3  对小鼠白细胞游走的影响

    取小白鼠60只，随机分为6组，每日ig给药1次，连续7天，末次用药后30min，ip0.7%醋酸0.2ml/10g，20min后取腹腔渗出液20ul，测白细胞总数，结果表明，克痹康对小白鼠白细胞游走无明显影响。

2.3  镇痛作用

    选健康小白鼠72只，雌雄各半，随机分为6组，ig给药，每日两次，连续两天，末次给药后40min，ip0.5%醋酸0.2ml/只，观察15min内各鼠的扭体次数，计算镇痛率。结果表明（表8），克痹康3个剂量组和阿斯匹林组均可明显减少扭体次数。

表8  克痹康对小鼠的镇痛作用（扭体法）

3  讨论

    克痹康能明显抑制大鼠佐剂性关节炎致炎足和非致炎足的足跖肿胀，表明它能抑制大鼠佐剂关节炎的原发病变和继发病变，大中剂量组有增加佐剂性关节炎大鼠体重的趋势。3个剂量组均能明显抑制大鼠蛋清性关节炎足跖肿胀。其对关节炎的抑制作用弱于5mg/kg的强的松。克痹康大中剂量组均能明显降低醋酸致炎后小鼠腹腔渗出液中的伊文斯蓝含量 ，提示能抑制腹腔毛细血管的通透性，其作用强度与30ug/kg的雷公藤甲素相当，虽有抑制棉球肉芽肿形成的趋势，但无统计学意义。克痹康大中剂量能抑制2.4-二硝基氯苯所致的小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应，能抑制小鼠网状内皮系统对印度墨汁的吞噬功能，但对白细胞游走无明显影响，表明其对免疫系统的某些环节有抑制作用。克痹康可减少小白鼠扭体次数，表明有镇痛作用。

    总之，克痹康有明显的抗炎、抑制免疫和镇痛作用，为其治疗类风湿性关节炎提供了药理学依据。